ข่าว บริษัท เกี่ยวกับ จากการสังเคราะห์ไปสู่การทําความสะอาด: จุดสําคัญในการควบคุมคุณภาพในกระบวนการผลิต HEPES buffer

ในสาขาชีวเคมีและชีววิทยาโมเลกุล, HEPES buffer (4- ((2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid) ใช้อย่างแพร่หลายในการปลูกเซลล์, การวิจัยโปรตีนชุดวินิจฉัยทางชีวเคมี และกรณีอื่น ๆ เนื่องจากความสามารถในการระวังความผิดพลาดที่ดีการประกันคุณภาพของ HEPES buffer เป็นสิ่งสําคัญสําหรับความแม่นยําของการทดลองวิจัยทางวิทยาศาสตร์ที่เกี่ยวข้องและความมั่นคงของผลิตภัณฑ์ชีววิทยา.ทั้งหมดนี้เริ่มจากการควบคุมคุณภาพอย่างเข้มงวดในกระบวนการผลิตของมัน จากการสังเคราะห์จนถึงการทําความสะอาด ซึ่งจะวิเคราะห์ในรายละเอียดต่อไปนี้

1กระบวนการสังเคราะห์และความสัมพันธ์คุณภาพของ HEPES buffer
การสังเคราะห์ด้วยไฮโดรคซิเอธิลปิเปาเรซีนและโซเดียมคลอโรเอธานซัลโฟเนตเป็นวัสดุแท้: ในวิธีนี้hydroxyethylpiperazine และโซเดียมคลอโรเอธานซัลโฟเนต ผ่านปฏิกิริยาแทนที่ในสภาพปฏิกิริยาที่เหมาะสมในกระบวนการนี้, อุณหภูมิปฏิกิริยา, เวลาปฏิกิริยาและสัดส่วน molar ของวัตถุดิบเป็นปัจจัยสําคัญที่ส่งผลต่อกระบวนการปฏิกิริยาและความบริสุทธิ์ของผลิตภัณฑ์.อาจทําให้เกิดผลข้างเคียง, สร้างสารสกปรกและลดความบริสุทธิ์ของ HEPES; หากเวลาปฏิกิริยาสั้นเกินไป, การปฏิกิริยาไม่สมบูรณ์และผลผลิตลดลง.
เส้นทางการสังเคราะห์ของโซเดียมไอเซธิโอเนตและเอธีลไพเปอเรซีน: เส้นทางการสังเคราะห์นี้มีหลายขั้นตอนและต่อมาดึงกับเอธิลปิเปาเรซีนในขั้นตอนการเปิดตัว การเลือกและปริมาณยาของตัวเปิดตัวจะส่งผลต่อกิจกรรมของโซเดียมไอเซธิโอเนต และจากนั้นจะส่งผลต่อผลของการปฏิกิริยาคอนเดนเซชั่นต่อมาระหว่างปฏิกิริยาหมัก, pH ของระบบปฏิกิริยามีบทบาทสําคัญในอัตราปฏิกิริยาและโครงสร้างผลิตภัณฑ์จําเป็นต้องมีตัวควบคุมกรด-ฐาน เพื่อทําให้ค่า pH ของระบบปฏิกิริยามั่นคงอยู่ในช่วง pH ที่เหมาะสม.

2. ผลของกระบวนการทําความสะอาดต่อคุณภาพของ HEPES buffer

1วิธีการกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระจกกระผลิตภัณฑ์ดิบที่สังเคราะห์ถูกละลายในสารละลายที่เหมาะสม, และ HEPES จะกระจกและหลั่งลงอย่างช้า ๆ โดยการเย็นหรือระเหยสารละลายช้า ๆ ขณะที่สิ่งสกปรกยังคงอยู่ในเหลวแม่วิธีนี้มีความต้องการสูงมากสําหรับการควบคุมอุณหภูมิการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิที่รวดเร็วเกินไปอาจนําไปสู่ความเร็วการกระจายกระจกที่ไม่เท่าเทียมกัน ซึ่งส่งผลกระทบต่อความบริสุทธิ์และรูปร่างของอนุภาคของกระจก

2. โครมาโตเกอรี่แลกยอน: การแยกได้รับการดําเนินการขึ้นอยู่กับความสามารถที่แตกต่างกันในการสับสับและ desorption ของ HEPES และปริศษะบนธ อร์แลกยอนเมื่อสารละลายผสมที่มี HEPES และสารสกปรกผ่านเสาพริกแลกยอน, HEPES และสารสกปรกจะแลกเปลี่ยนและอัดซึมกับยอนบนสับในระดับที่แตกต่างกัน โดยการเลือกเอลูเอนต์ที่เหมาะสมและสภาพการเอลูเอชั่นHEPES สามารถระคายระคายได้อย่างคัดเลือกเพื่อบรรลุเป้าหมายของการทําความสะอาดอย่างไรก็ตามวิธีนี้ต้องควบคุมปริมาตรอย่างละเอียด เช่น อัตราการไหลและปริมาตรของสารระบาย

3การตรวจสอบและติดตามคุณภาพระหว่างการผลิต

(I) การตรวจสอบตัวชี้วัดคุณภาพหลัก

1การตรวจสอบความบริสุทธิ์: ครอมทอเกรฟีเหลวที่มีประสิทธิภาพสูง (HPLC) เป็นวิธีที่ทั่วไปในการตรวจสอบความบริสุทธิ์ของ HEPES โดยการฉีดตัวอย่างเข้าไปในระบบ HPLCHEPES และสารสกปรกถูกแยกแยกตามระยะเวลาการเก็บรักษาที่แตกต่างกันบนคอลัมน์โครมาโทเกราฟิค, แล้วสารประกอบแต่ละส่วน จะถูกตรวจพบโดยเครื่องตรวจจับ เพื่อคํานวณความบริสุทธิ์ของ HEPES ได้อย่างแม่นยํา

2การตรวจสอบ pH: ค่า pH ของ HEPES buffer มีความสัมพันธ์โดยตรงกับผลการระบายของมันใช้เครื่องวัด pH ที่มีความแม่นยํา เพื่อวัดค่า pH ของสารละลาย HEPES ภายใต้สภาพที่กําหนดไว้ เพื่อกําหนดว่ามันอยู่ในช่วงมาตรฐานสําหรับผลิตภัณฑ์ HEPES ที่ใช้ได้ต่างกัน มาตรฐานค่า pH ต่างกันนิดหน่อยHEPES ที่ใช้ในการปลูกเซลล์ต้องให้ค่า pH อยู่ภายในช่วง pH ที่ใช้สําหรับการปลูกเซลล์เฉพาะเจาะจง เพื่อให้มั่นคงในสภาพแวดล้อมการเจริญเติบโตของเซลล์.

3การตรวจหาสารสกัด: ใช้สเปคโทรสโกปีการดูดซึมอะตอม (AAS)สเปคตรเมตรมวลพลาสมาที่เชื่อมโยงด้วยการผลักดัน (ICP-MS) และเทคโนโลยีอื่น ๆ เพื่อตรวจหาสารสกปรกโลหะหนัก (เช่น鉛), แมร์กิวรี่, แคดมิอุม, ฯลฯ); ใช้เทอร์บิดิเมตรี่หรือไอออนโครมาโตเกอรี่ เพื่อตรวจหาสารสกัดอันยอน เช่นซัลฟาตการควบคุมสารสกปรกอย่างเข้มงวด สามารถป้องกันให้สารสกปรกไม่กวนการทดลองหรือกระบวนการผลิตในภายหลัง.